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更新時間:2018-11-03
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產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
人肝內(nèi)膽管上皮細胞*培養(yǎng)基說明書 | Human intrahepatic biliary epithelial cell medium | 100mL |
人肝內(nèi)膽管上皮細胞*培養(yǎng)基說明書細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
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人肝內(nèi)膽管上皮細胞*培養(yǎng)基說明書細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
1,000 URNA Polymerase, T3, 1000 U
1 kit (25 reactions)PCR Dig Probe Synthesis 1pc
2.5 gCollagenase H, 2.5g, non-steri
1,000 U (4 x 250 U) for up to 2,000 reactions of 20 µl final volume each containing 0.5 U Taq DNA PolymeraseTaq DNA Polymerase, 5 U/μl(up to 3 kb)
1,000 U (4 x 250 U) for up to 2,000 reactions of 20 µl final volume each containing 0.5 U Taq DNA PolymeraseTaq DNA Polymerase, 1 U/μl(up to 3 kb()
2,500 U (10 x 250 U) for up to 5,000 reactions of 50 µl final volume each containing 0.5 U Taq DNA PolymeraseTaq DNA Polymerase, 5 U/μl( up to 3 kb)
125 U for up to 50 reactions of 50 µl final volume each containing 2.5 U FastStart Taq DNA PolymeraseFastStart High Fidelity PCR System, dNTPack(up to 5 kb)
2,500 U (10 x 250 U)FastStart Taq DNA Polymerase,
人肝內(nèi)膽管上皮細胞*培養(yǎng)基說明書桿菌屬 Lactobacillus sp.燼灰鏈霉菌 Streptomyces cinereogriseus
人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞CCD-1095Sk(人腺浸潤性導(dǎo)管旁皮膚細胞)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae人急性混合型白血病細胞
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeA2(人腺樣囊性細胞)
大腸桿菌 Escherichia coli毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
佛羅里達側(cè)耳 Pleurotus florida釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
C-33 A(人子宮頸細胞)猴菌
費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium frediiAsPC-1(人胰腺細胞)
煙曲霉 Aspergillus fumigatus金色鏈霉菌 Streptomyces aureus
NIH 3T3/小鼠成纖維細胞Caki-2(人腎透細胞細胞)
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis黑木耳 Auricularia auricula
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae小鼠肺大靜脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基
人顱蓋造骨細胞*培養(yǎng)基毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes